關于人類感染B19病毒的研究

b19病毒是直徑為23nm無囊膜包裹， 3500堿基組成的單鏈dna病毒， 屬微小病毒科， 是紅細胞病毒屬的一種。 其在分子生物學上有獨特性， 末端回文序列長達365個堿基， g、c含量高， 使得b19病毒二級結構牢固， 而不易克隆入細菌中。 b19病毒同其他小dna病毒一樣有種屬特異性。 有兩種殼蛋白：vp1(83kd)和vp2(58kd)， vp2占優勢， vp1位于殼體外部， 易與抗體結合。 此外b19病毒有一非結構蛋白nsi,可引起細胞死亡， 但其作用與細胞毒素或成空蛋白不同。 其對熱穩定， 56℃30分鐘仍可存活。

b19病毒， 對人紅系細胞有特別嗜性,此病毒可在新鮮人類骨髓細胞、外周血細胞、胎兒肝細胞、紅白血病細胞、臍血細胞內生長，

但在任何一個培養系統， 其繁殖均有賴于紅細胞及特異的促紅細胞素的存在， 細胞敏感性隨紅細胞分化而增強。 目前利用上述系統可研究該病毒的特性,但不能用作標本分離。 b19病毒對宿主細胞有直接細胞毒作用， 可引起前紅細胞超微結構的改變， 包括特征性的染色質偏移、偽足形成、空泡等， 殼蛋白顆粒存在于已凋亡的細胞核質空隙中。 最近b19病毒的受體被確定是紅細胞糖苷脂或紅細胞p抗原， 它們對病毒有高度親和力， p抗原表達在巨核細胞、內皮細胞、胎肝細胞中也存在， 有些個體缺乏p抗原， 因而對b19病毒感染不敏感。

感染b19后會產生特異性抗體。 在實驗接種人后igm抗體約在10-12天出現， 持續數月,igg于接種后2周出現，

一般會終身存在,再次感染后igg還會升高。 絕大多數病人即使igg水平很低， 仍有長期的免疫力。 血iga抗體亦可測到， 其對上呼吸道有防御作用。

病毒的vp1及vp2均有中和位點， 但vp1是主要抗原,其特定區域抗原是線性的,而vp2的中和位點具三維結構。 只有vp1獨特區或vp1-vp2融合后產生的蛋白,才能誘發中和抗體產生， 而單純vp2不能產生有活性的中和抗體。 持續感染是由于免疫受抑制的個體不能產生中和抗體的結果。

b19病毒與有關臨床病征。 實驗性微小病毒(hpvb19)感染是一急性雙期疾病。 通過志愿者鼻內接種在第5-6天血中可測到病毒， 8-9天達高峰， 伴隨病毒血癥有非特異性急性流感樣癥狀， 接種10-14天后有特異性抗體產生， 并伴有典型的ei癥狀，

志愿者有全身性紅疹出現和關節炎發生， 骨髓抑制與病毒血癥相符， 一過性再障是感染早期的表現。 臨床上見到的與b19病毒相關的病癥有：

第5病(ei)。 這是急性b19病毒感染引起的最常見的輕型兒童疾病， 典型表現是面頰部邊界清晰的紅斑即“掌拍頰”,軀干及肢體近端一過性網狀斑丘疹出現， 疹前1周可能有發熱、輕微呼吸道癥狀和周身不適， 而出疹時常無明顯癥狀。 ei常在冬末初春， 某個社區內暴發流行， 而單個病人發病時易與麻疹或其他兒童出疹性疾病相混。

再障危象(tac)。 對于一個已患有溶血的病人,急性b19病毒感染會引起一過性tac發生。 骨髓中紅細胞生成突然停止， 網織紅細胞下降， 貧血惡化， 暫時性紅細胞生成受抑制是其感染的常見特征〔8〕。

一過性tac是自限性疾病,癥狀不僅包括嚴重貧血所致的呼吸困難、疲勞， 還有極度倦怠、精神錯亂、充血性心力衰竭。 (這種危象在鐮狀細胞貧血的病人可導致腦血管意外， 或死于嚴重貧血和心衰)。 b19病毒除導致再障貧血危象外， 它還與其他慢性溶血性貧血如遺傳性球形紅細胞增多癥、

先天性紅細胞缺陷病、β-地中海貧血等危象有關。 b19病毒感染可能是所有溶血性貧血危象的原因。 tac也發生在紅細胞應激狀態,如出血和鐵劑缺乏時及在骨髓纖維化和骨髓移植后。

胎兒水腫(fh)。 b19病毒宮內感染引起非免疫性胎兒水腫， 它使自然流產的危險性增加， 特別是在懷孕1-3個月。 由于感染了胎兒前紅細胞， 造成嚴重貧血，

而導致9%的胎兒死亡， 但很少有先天性畸形。 在20例b19病毒dna陽性的死胎組織， 17例胎兒有非免疫性水腫， 發病機制尚不清楚。 推測：嚴重貧血使體內液體聚集致充血性心力衰竭、全身水腫；為代償貧血， 肝臟造血活躍， 從而減少了蛋白質的合成， 引起低蛋白血癥， 表現為水腫；溶血后含鐵血黃素沉著， 導致肝纖維化、肝功能減低， 產生腹水、靜脈曲張。 胎兒水腫可通過超聲波測出， 通過宮內輸注紅細胞進行治療。

關節病。 關節炎和關節痛是b19病毒感染的常見臨床表現,在兒童發病率約8%。 hosszn發現1例8歲女孩， 出現了一過性腕、踝、關節炎， 但缺乏ei表現。 1993年， nocton曾報道了22例患兒關節病與b19病毒感染有關,其中20例為關節炎,2例為關節痛， 11個孩子有腫脹、活動受限等體征。 關節癥狀多在數周內自行恢復，偶而也可持續數月或數年。

持續感染與單純性紅細胞發育不良。持續性b19病毒感染,會使先天性免疫缺損(nezelof′s綜合征)病人、兒童淋巴細胞白血病和其他癌的化療后或緩解期的病人以及艾滋病病人，出現單純性紅細胞發育不良這一溶血性疾病。臨床上貧血周期性發作與病毒血癥有關。在緩解期，病毒只能通過pcr擴增法測到,一般則可通過打點雜交技術來測b19病毒基因。

其他疾病。兒童特發性血小板減少性紫癜( idiopathic trombocytopenic purpura,itp)可能與b19病毒感染有關。1994年murray j c報道了在35個典型itp病人中17例(49%)在外周血或骨髓中b19 dna陽性，6例(17%)抗b19 igm陽性，8例(23%)抗b19 igg陽性，而對照組無dna陽性及igm陽性出現。在15例川崎病病人中亦有類似發現，其中10例查到b19 dna或特異性igm。在法國1987-1990年觀察的24例b19病毒感染的患兒中，1例5個月的嬰兒感染后出現了嚴重的急性心肌炎,1例甲肝患兒出現了急性肝衰竭，2例發生了henoch-schonlein紫癜。b19病毒可引起急性呼吸道疾病、急性胃腸炎、淋巴結病（如腸系膜淋巴結炎或假性闌尾炎)。有人觀察了21例由于b19病毒感染而出現急性呼吸道疾病的患兒，21個孩子中，15個嬰兒患有支氣管炎或細支氣管炎，3個幼兒患了急性喉炎，3個學齡兒有急性哮喘發作。

實驗室檢查和治療。實驗室檢查對于鑒別第五病與其他病毒疹、確定是否存在保護性抗體、妊娠中有無近期感染、特別是區分微小病毒感染或其他原因引起紅細胞生成障礙，均是有意義的。近期b19病毒感染最好查igm抗體，常用捕獲法或放射免疫測定，igg抗體對診斷急性☆禁☆感染無意義,其存在僅表明曾感染過，用于血清流行病學調查。目前最敏感檢測b19病毒的方法是pcr法，pcr法結合原位雜交在細胞或組織切片中可測到小量的病毒dna，但要注意假陽性結果,最易進行的方法是在血清或組織勻漿的打點雜交和固定組織的原位雜交。dna雜交是再障危象時測定有無病毒血癥的最好方法，其不僅在急性期、間歇期，甚至感染后好幾個月仍能測出。且可用于檢測排泄物、滑液、唾液和b19病毒感染所致流產或宮內死亡的胎兒組織。

治療ei及tac目前僅局限于對癥處理,抗病毒治療對于持續的微小病毒感染是有效的。市售的免疫球蛋白制劑是中和抗體的一個好的來源，有先天性

免疫缺陷的病人，每日給予免疫球蛋白400mg/kg靜注，10天一療程，通過間斷注射，直到血清中測不到病毒為止。aids病人5-10天一療程，雖在幾個月后會復發，但再用仍有效。

流行病學和預防。b19病毒感染呈世界范圍分布，一年四季均可發生,以冬春季為高峰。兒童常見ei的暴發流行，大約每3-4年一個周期，溶血病人中一過性tac的暴發往往與其同時，大約有50%成年人有b19病毒igg抗體,年長人中比率增至90%,每年血清陽轉率達1.5%。因此大多數個體在兒童期已獲得免疫，但在流行期感染率仍很高，10%～60%易感學齡兒可出現ei，且有家族聚集性。

b19病毒可經輸入血制品或破損皮膚(紋身)等傳播,最常見于接受濃縮凝血因子治療的病人。目前發現呼吸道是b19病毒通常感染和排毒的途徑，直接密切接觸是最可能的傳播方式。此外母嬰傳播及器官移植時b19病毒通過供者傳給受者，亦不容忽視。

大多數ei病人出現典型表現時已過了傳染期，呼吸道及血中不能檢出b19dna，不需要隔離。臨床上最主要的危險來自有高滴度病毒血癥的病人，如一過性tac患者或慢性單純紅細胞再生障礙者，這些病人血清中b19 dna常為陽性，具傳染性，在排毒期應單間隔離，接觸時需帶口罩，對患者呼吸道分泌物及血標本、排泄物等應妥善處理。

在b19病毒流行期可注射含有中和抗體的免疫球蛋白制劑及人類恢復期抗血清。目前尚無預防性疫苗,但有希望用重組的核殼體作免疫原。因為在組織培養中培養病毒是困難和危險的,而重組的b19病毒核殼體可在桿狀病毒中產生，使接種動物產生中和抗體,無佐劑亦可。重組的分子生物學技術為一種安全有效的b19病毒疫苗的研制創造了條件。

關節癥狀多在數周內自行恢復，偶而也可持續數月或數年。

持續感染與單純性紅細胞發育不良。持續性b19病毒感染,會使先天性免疫缺損(nezelof′s綜合征)病人、兒童淋巴細胞白血病和其他癌的化療后或緩解期的病人以及艾滋病病人，出現單純性紅細胞發育不良這一溶血性疾病。臨床上貧血周期性發作與病毒血癥有關。在緩解期，病毒只能通過pcr擴增法測到,一般則可通過打點雜交技術來測b19病毒基因。

其他疾病。兒童特發性血小板減少性紫癜( idiopathic trombocytopenic purpura,itp)可能與b19病毒感染有關。1994年murray j c報道了在35個典型itp病人中17例(49%)在外周血或骨髓中b19 dna陽性，6例(17%)抗b19 igm陽性，8例(23%)抗b19 igg陽性，而對照組無dna陽性及igm陽性出現。在15例川崎病病人中亦有類似發現，其中10例查到b19 dna或特異性igm。在法國1987-1990年觀察的24例b19病毒感染的患兒中，1例5個月的嬰兒感染后出現了嚴重的急性心肌炎,1例甲肝患兒出現了急性肝衰竭，2例發生了henoch-schonlein紫癜。b19病毒可引起急性呼吸道疾病、急性胃腸炎、淋巴結病（如腸系膜淋巴結炎或假性闌尾炎)。有人觀察了21例由于b19病毒感染而出現急性呼吸道疾病的患兒，21個孩子中，15個嬰兒患有支氣管炎或細支氣管炎，3個幼兒患了急性喉炎，3個學齡兒有急性哮喘發作。

實驗室檢查和治療。實驗室檢查對于鑒別第五病與其他病毒疹、確定是否存在保護性抗體、妊娠中有無近期感染、特別是區分微小病毒感染或其他原因引起紅細胞生成障礙，均是有意義的。近期b19病毒感染最好查igm抗體，常用捕獲法或放射免疫測定，igg抗體對診斷急性☆禁☆感染無意義,其存在僅表明曾感染過，用于血清流行病學調查。目前最敏感檢測b19病毒的方法是pcr法，pcr法結合原位雜交在細胞或組織切片中可測到小量的病毒dna，但要注意假陽性結果,最易進行的方法是在血清或組織勻漿的打點雜交和固定組織的原位雜交。dna雜交是再障危象時測定有無病毒血癥的最好方法，其不僅在急性期、間歇期，甚至感染后好幾個月仍能測出。且可用于檢測排泄物、滑液、唾液和b19病毒感染所致流產或宮內死亡的胎兒組織。

治療ei及tac目前僅局限于對癥處理,抗病毒治療對于持續的微小病毒感染是有效的。市售的免疫球蛋白制劑是中和抗體的一個好的來源，有先天性

免疫缺陷的病人，每日給予免疫球蛋白400mg/kg靜注，10天一療程，通過間斷注射，直到血清中測不到病毒為止。aids病人5-10天一療程，雖在幾個月后會復發，但再用仍有效。

流行病學和預防。b19病毒感染呈世界范圍分布，一年四季均可發生,以冬春季為高峰。兒童常見ei的暴發流行，大約每3-4年一個周期，溶血病人中一過性tac的暴發往往與其同時，大約有50%成年人有b19病毒igg抗體,年長人中比率增至90%,每年血清陽轉率達1.5%。因此大多數個體在兒童期已獲得免疫，但在流行期感染率仍很高，10%～60%易感學齡兒可出現ei，且有家族聚集性。

b19病毒可經輸入血制品或破損皮膚(紋身)等傳播,最常見于接受濃縮凝血因子治療的病人。目前發現呼吸道是b19病毒通常感染和排毒的途徑，直接密切接觸是最可能的傳播方式。此外母嬰傳播及器官移植時b19病毒通過供者傳給受者，亦不容忽視。

大多數ei病人出現典型表現時已過了傳染期，呼吸道及血中不能檢出b19dna，不需要隔離。臨床上最主要的危險來自有高滴度病毒血癥的病人，如一過性tac患者或慢性單純紅細胞再生障礙者，這些病人血清中b19 dna常為陽性，具傳染性，在排毒期應單間隔離，接觸時需帶口罩，對患者呼吸道分泌物及血標本、排泄物等應妥善處理。

在b19病毒流行期可注射含有中和抗體的免疫球蛋白制劑及人類恢復期抗血清。目前尚無預防性疫苗,但有希望用重組的核殼體作免疫原。因為在組織培養中培養病毒是困難和危險的,而重組的b19病毒核殼體可在桿狀病毒中產生，使接種動物產生中和抗體,無佐劑亦可。重組的分子生物學技術為一種安全有效的b19病毒疫苗的研制創造了條件。